保留上清液;上清液再加 SAS 到 0.5:1(v/v) ,再次离心得到沉淀。
不一定,各种抗体盐析所需 *** 铵的饱和度也不完全相同,一般情况是在30%到50%饱和度的 *** 铵可以将抗体沉淀出来。为了达到更好的分离纯化效果,先从低饱和度的 *** 铵加起,分级沉淀出抗体。
郭敦顒浓度由10%提高到15%,这浓度的表示是不清晰的,是什么样性质的%应行说明,比如说是重量%,但在生化实验方面一般并不运用这一 *** ,更常用的是G/V式,即克/升或g/100ml。
*** 铵分级:不同的蛋白质可用不同浓度的 *** 铵沉淀,由此将不同的蛋白质分开的 *** 。用于蛋白质分离纯化的盐析技术。 *** 铵:无色结晶或白色颗粒。无气味。280℃以上分解。水中溶解度:0℃时70.6g,100℃时108g。
沉淀反应至少应在50mm/L缓冲液中进行。在 *** 铵分级沉淀蛋白质的注意事项有沉淀反应至少应在50mm/L缓冲液中进行,是为了平衡 *** 铵溶解时产生的轻℡☎联系:酸化作用。
度时,每升水可以溶解7096克 *** 铵(此时重量百分比为442%,摩尔浓度为35 mol/L,比重2428g/cm3)。
饱和 *** 铵的浓度为0℃时70.6g,100℃时108g。溶解度,符号S,在一定温度下,某固态物质在100g溶剂中达到饱和状态时所溶解的溶质的质量,叫做这种物质在这种溶剂中的溶解度。物质的溶解度属于物理性质。
因为 *** 铵能降低蛋白质在溶液中的溶液解,使蛋白质凝聚而从溶液中析出,这种现象叫做盐析,属于物理变化,加水稀释后又可复原。
溶液中的离子强度不同时,不同蛋白质的溶解度不同。高浓度的盐离子在蛋白质溶液中可与蛋白质竞争水分子,从而破坏蛋白质表面的水化膜,降低其溶解度,使之从溶液中沉淀出来。
由于饱和 *** 铵是强电解质,解离作用强,饱和 *** 铵的解离可抑制蛋白质弱电解质的解离,使蛋白质带电荷减少,更容易聚集析出。
盐析是通过向蛋白质溶液中加入高浓度中性盐(如 *** 铵),致使蛋白质发生沉淀的蛋白质分离技术。