为什么用钙离子处理原核细胞获感受态细胞 (感受态细胞)

为什么用钙离子处理原核细胞获感受态细胞?

原因：目的基因导入植物细胞时，由于没有经过钙离子处理没有变成感受态细胞，细胞的通透性小，目的基因难以进入细胞。感受态细胞主要原理：通过处理使细胞的通透性变大。

什么是感态细胞,它有什么特点,它如何制备?

1、感受态细胞的制备常用冰预冷的CaCl2处理细菌的 *** 制备，即用低渗CaCl2溶液在低温0℃时处理快速生长的细菌，从而获得感受态细菌。感受态细胞的特点 理化 *** 诱导细胞，使其处于最适摄取和容纳外来DNA的生理状态。

2、特点：处于最适摄取和容纳外来DNA的生理状态 CaCl2法：操作：将快速生长的大肠杆菌置于经低温（0℃）预处理的低渗氯化钙溶液中，便会造成细胞膨胀，细胞膜通透性发生变化，极易与外源DNA相粘附并在细胞表面形成复合物。

3、培养温度。较低的温度培养有利于感受态的形成，这样可以获得较高的感受态，但太低又不实用，因而产生了 Inoue 的高效感受态制备 *** ，它实际是利用了所有有利于感受态的文献而得出的一个非常理想 *** 。

4、 *** 一：细菌转化的 *** 多以Mendel和Higa（1970）的发现为基础，其基本 *** 是用冰预冷的CaCl2或多种2价阳离子等处理细菌，使之进入感受态得以转化。用CaCl2制备新鲜或冷冻的大肠杆菌感受态细胞，常用于成批制备感受态细菌。

5、学习氯化钙法制备大肠杆菌感受态细胞的 *** 。学习将外源质粒 DNA 转入受体菌细胞并筛选转化体的 *** 。

制备感受态细胞的影响因素有哪些

．质粒的大小及构型的影响：用于转化的应主要是超螺旋的 DNA。7．一定范围内，转化效率与外源 DNA 的浓度呈正比。

（1）质粒DNA的质量和浓度：用于转化的质粒DNA应主要是超螺旋态的，转化率与外源DNA的浓度在一定范围内成正比，但当加入的外源DNA的量过多或体积过大时，则会使转化率下降。

感受态，指的是细菌在一定的条件下可以吸收外部环境中的DNA的一种生理状态，它是由受体菌的遗传性状所决定的，同时也受菌龄、外界环境因子的影响。

影响转化效率的因素很多，主要有：感受态细胞制备的质量、受体菌生长期（大肠杆菌在对数生长期易产生感受态）、质粒的大小和构型、所用试剂的纯度、接种前菌种的保藏方式、冰浴时间（延长冰浴时间可略微提高转化率）。

培养温度。较低的温度培养有利于感受态的形成，这样可以获得较高的感受态，但太低又不实用，因而产生了 Inoue 的高效感受态制备 *** ，它实际是利用了所有有利于感受态的文献而得出的一个非常理想 *** 。

制备感受态细胞的关键是将外源DNA分子引入受体细菌，使之获得新的遗传性状。主要原理就是通过处理使细胞的通透性变大，直观的说，使得细胞膜表面出现一些孔洞，便于外源基因或载体进入感受态细胞。

感受态细胞的制备 *** 是什么?

1、分装保存（40%甘油与感受态细胞1：1混合，使甘油的终浓度为20%）。

2、感受态细胞的制备常用冰预冷的CaCl2处理细菌的 *** 制备，即用低渗CaCl2溶液在低温0℃时处理快速生长的细菌，从而获得感受态细菌。感受态细胞的特点 理化 *** 诱导细胞，使其处于最适摄取和容纳外来DNA的生理状态。

3、细菌转化的 *** 多以Mendel和Higa（1970）的发现为基础，其基本 *** 是用冰预冷的CaCl2或多种2价阳离子等处理细菌，使之进入感受态得以转化。用CaCl2制备新鲜或冷冻的大肠杆菌感受态细胞，常用于成批制备感受态细菌。

感受态细胞(细菌),什么是感受态细胞

1、使细胞处于能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，这种细胞称为感受态细胞。

2、细胞处于能够吸收DNA的状态称感受态，处于感受态的细胞称作感受态细胞。受体细胞经过一些特殊 *** （如：CaCl2，RuCl等化学试剂法）的处理后，细胞膜的通透性发生变化，成为能容许多有外源DNA的载体分子通过的感受态细胞。

3、感受态细胞指的是经处理后，处于能吸收周围环境中DNA分子生理状态的微生物细胞，在转基因技术操作过程中要将重组DNA分子导入微生物受体细胞时就需要用感受态细胞。

4、视觉感受态细胞（视网膜细胞）：原理：视网膜细胞是感受光线的感受态细胞。它们包含感光色素，当光线照射到视网膜上时，感光色素将光能转化为电信号。 *** ：视网膜细胞可以通过离体或体外培养的方式获得。

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